型 號
產(chǎn)品時間2024-02-21
所屬分類大鼠原代細胞
報價2600
收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠角膜基質(zhì)細胞 | 貨號 | EY-XY3501 |
英文名稱 | Rat Corneal Keratocytes Cells | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測:波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:大鼠角膜基質(zhì)細胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
大鼠角膜基質(zhì)細胞采用膠原酶消化后組織貼塊法制備而來。大鼠角膜基質(zhì)細胞分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部最薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細胞層。角膜基質(zhì)層是角膜的主要組成部分,占據(jù)角膜厚度的90% |
1.準備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7.計數(shù):用計數(shù)板計數(shù),如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。
8.培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶蓋需擰松半圈。
嗅球蛋白3抗體
通用型細胞對氧磷酶1(PON1)有機磷酸酶活性比色法定量檢測試劑盒
胞核微型RNA(Pre-RNA)超濾法分離試劑盒
氣生蘭(epiphytic)播種增殖培養(yǎng)基
載玻片細胞JNK/SAPK蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
通用型加拿大低酸菜籽油黑脛病/油菜腐爛病/甘藍黑莖病菌(Blackleg of Canola/Leptosphaeria maculans/Phoma lingam)基因檢測試劑盒
細胞糖原硫酸蒽酮比色法定量檢測試劑盒
細胞總酶連續(xù)循環(huán)熒光定量檢測試劑盒
體液氧化型甘肽(GSSG)濃度比色法定量檢測試劑盒
細菌硫酸氫鉍選擇瓊脂平板
BAD蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
乳品果膠化學比色法定量檢測試劑盒
M. tuberculosis RFLP基因分析試劑盒
細胞PKCα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
動物細胞β-半乳糖苷酶活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測試劑盒
致癌基因C-Myc單克隆抗體
谷半γ合成酶抗體
溶酶體相關(guān)膜蛋白2(CD107B)抗體
MAF1蛋白抗體
細胞粘合素(固生蛋白)抗體
艾滋病病毒EP3抗體
磷酸甘露糖變位酶2抗體
大鼠角膜基質(zhì)細胞Caspase抑制劑COP蛋白抗體
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