傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

DiFi人結(jié)直腸癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人內(nèi)根殼細胞RNAHHIRSC miRNA5 μg 山羊內(nèi)啡肽(EP)ELISA試劑盒 Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的羊抗雞IgG 0.1ml

FUSIP1： 富含絲酸/精酸重復結(jié)構(gòu)蛋白抗體 小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);DG6-VAP33-GFP 小鼠表皮黑色素細胞培養(yǎng)基 100mL

ICOSLG Others Human 人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 人細胞裂解液 (陽性對照) 山羊腦啡肽(ENK)ELISA試劑盒 Goat Anti-Chicken IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的羊抗雞IgG 0.1ml

FUT6： 巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶6抗體 人腎上皮細胞總RNAHREpiC NA

QBC939細胞，人膽管癌細胞 褐鼠胰島素瘤上皮細胞,RIN-m細胞 NIH/3T3, 小鼠成纖維細胞系 山羊檢測(e)ELISA 試劑盒 Goat Anti-Chicken IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的羊抗雞IgG 0.1ml

CA1 Others Human 人 CA1 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA 試劑盒 NT-3  人神經(jīng)營養(yǎng)因子3 96T

Muc2： 粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體 人生發(fā)基質(zhì)細胞裂解物HHGMCL

MS1小鼠胰島內(nèi)皮細胞 MS1 mouse islet endothelial cells DMEM培養(yǎng)基+5%FBS 大鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 NGF(Human Nerve growth factor)  人的神經(jīng)生長因子 96T

Mucin 4： 粘蛋白4抗體 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0191RBE(人膽管癌細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA 試劑盒 OFQ/N(Mouse orphanin FQ/nociceptin)  小鼠孤腓肽 96T

DiFi人結(jié)直腸癌細胞P388細胞，小鼠白血病細胞 空腸彎曲桿菌 大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1 人苯諾龍/苯去(NP)ELISA 試劑盒 MLC/Myosin light chain 3 peptide 肌球蛋白輕鏈3抗原 0.5mg

IFNGR1： 干擾素-gamma受體1抗體 FAS Others Mouse 小鼠 FAS / TNFRSF6 / CD95 人細胞裂解液 (陽性對照)

人結(jié)直腸腺癌細胞;HCT-15 [HCT15] 人苯(LPA)ELISA 試劑盒 MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) 巨噬細胞移動抑制因子抗原 0.5mg

IL-1 Alpha Propeptide： 白介素1α前肽/IL-1α前肽抗體 人前列腺癌細胞;DU 145 [DU145;DU-145]

P815(小鼠肥大細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人 CD1B & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 人本周蛋白(BJP) ELISA 試劑盒 MIP-1 Beta (macrophage inflammatory protein 1 Beta) 巨噬細胞炎癥因子1β 抗原 0.5mg