傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

NCI-H3255人肺癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

HPlEpC-c 人類胎盤細胞上皮細胞 500,000cells 食管平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 豚鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 Rabbit Anti-dog IgG/PE PE標記的兔抗狗IgG 0.1ml

FKBP135： FKBP135蛋白抗體 CM-H128人角膜上皮細胞培養(yǎng)基100mL

V79(倉鼠肺細胞) 5×106cells/瓶×2 豚鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA 試劑盒 IgG/Bio 標記的驢抗兔IgG 0.1ml

FKBP25： 肽基脯酸異構酶酶FKBP25抗體 20. 細胞系統(tǒng)

人導管癌細胞;ZR-75-30 豚鼠補體因子B(CFB)ELISA試劑盒 Goat Anti-rabbit IgG/Bio 標記的羊抗兔IgG 0.1ml

NCI-H1703(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 PA317(成纖維細胞) 大鼠血管內(nèi)皮生長因子121(VEGF121)ELISA試劑盒 ADM (Rabbit soluble endothelial protein C receptor)  兔子腎上腺髓質(zhì)素 96T

MSH6： 錯配修復蛋白6抗體 牛胚氣管細胞;EB (NBL-4)

IFNL3 Protein Human 重組人 IFNL3 / IL28B / Ierleukin-28B 蛋白 (His 標簽) 大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)ELISA試劑盒 D-LDH  大鼠D-乳酸脫氫酶 96T

Mammaglobin B： 珠蛋白2抗體 LRRN3 Others Human 人 LRRN3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠腦成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒 VEGFR-2/sFLK-1(Human soluble vascular endothelial growth factor receptor-2)  人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2 96T

NCI-H3255人肺癌細胞D407細胞，人視網(wǎng)膜色素上皮細胞 出芽短梗霉 人急性T淋巴細胞性白血病細胞;I 2.1(CRL-2572) 人(T)ELISA 試劑盒 DAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受體-D1抗原 1mg

Hephaestin： 亞鐵氧化酶抗體 COCH Others Human 人 COCH / Cochlin 人細胞裂解液 (陽性對照)

水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S1 人高香草酸(HVA) ELISA 試劑盒 DRD3 receptor(dopamine D3 receptor) 多巴胺受體-D3抗原 0.5mg

HERC1： 鳥苷酸釋放因子p532蛋白抗體 人膀胱上皮永生化細胞;SV-HUC-1

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2 小鼠 AMICA1 / JAML 人細胞裂解液 (陽性對照) 人高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA 試劑盒 DRD4 receptor peptide 多巴胺受體-D4抗原 0.5mg