傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

MNT-1人黑色素瘤細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀(guān)察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(mǎn)至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 小鼠p53(p53)ELISA 試劑盒 SLCO1C1： 溶質(zhì)載體家族蛋白21成員1C1抗體 人胚肺成纖維細(xì)胞;HFL1

HONE1細(xì)胞，人鼻咽癌細(xì)胞 小鼠淋巴瘤細(xì)胞,EL4.IL-2細(xì)胞 CM-H030人外周血白細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 小鼠P21蛋白(P21)ELISA試劑盒 SLFN14： Schlafen家族14抗體 MMP8 Others Human 人 MMP-8 / CLG1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基-2FM-2-prf 小鼠Osterix蛋白(OSX)ELISA試劑盒 Slit1： 多重表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白4抗體 Lewis 小鼠肺癌細(xì)胞

Promocell C-26040 Placeal Epithelial CellGrowth Medium, 胎盤(pán)上皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml 小鼠opiorphin(opiorphin)ELISA試劑盒 SLIT2/Slil3： 神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體 CL-0304PC-3M(人前列腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠N-乙酰轉(zhuǎn)移酶1(NAT1)ELISA試劑盒 Slitrk1： 神經(jīng)突出相關(guān)蛋白Slitrk1抗體 人支氣管上皮細(xì)胞(HBEpiC)(5×105 )

Mast Cell Chymase： 肥大細(xì)胞類(lèi)1抗體 Hela, 人細(xì)胞系 小鼠成纖維細(xì)胞,3T3TK細(xì)胞 SPA-A1(肺腺癌細(xì)胞)

SIGLEC5 Others Human 人 SIGLEC5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒 PGE2 (Rabbit Prostaglandin E2)  兔子前列腺素E2 96T

Metronidazole(1C2)： 單克隆抗體 小鼠子細(xì)胞;U14

RH-35大鼠肝癌細(xì)胞 RH-35 rat hepatoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS 大鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA 試劑盒 FSH  魚(yú)促卵泡素 96T

MrpL12： 線(xiàn)粒體核糖體蛋白L12抗體 FGFR2 Others Human 人 FGFR2 / CD332 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

MNT-1人黑色素瘤細(xì)胞HBZY-1(大鼠腎小球系膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0369IR983F(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1 人抗環(huán)胍酸肽抗體(CCP)ELISA 試劑盒 ATF1 (Activating Transcription Factor1) 活化復(fù)制因子1 0.5mg

Hexokinase 1： 己糖激酶1抗體 人膀胱平滑肌細(xì)胞RNAHBdSMC miRNA5 μg

SC-1(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)ELISA 試劑盒 NPS/Neuropeptide S 神經(jīng)肽S 0.5ml

Hexokinase 2： 己糖激酶2抗體 HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

胎兒骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Fetal bone marrow mesenchymal stem cells 人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV IgM)ELISA試劑盒 NKB (Neurokinins B) 神經(jīng)B(抗原) 0.5mg