J82人膀胱移行細胞癌

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

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LRP5： 低密度脂蛋白受體相關蛋白5抗體 615小鼠樹突狀細胞肉瘤瘤株;DCS

HL-60人原髓細胞白血病細胞 HL-60 primary human myeloid leukemia cells IMDM(GIBCO)+20%FBS 大鼠載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒 IFN- Gamma (mouse) 小鼠γ干擾素 96T

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小腸隱窩上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 大鼠載脂蛋白A5(APOA5)ELISA試劑盒 CTACK/CCL27(Human cutaneous T cell-attracting chemokine,CTACK)  人皮膚T細胞虜獲趨化因子 96T

phospho-LRP1(Ser4523)： 0酸化低密度脂蛋白受體相關蛋白1抗體 小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞;DCS

J82人膀胱移行細胞癌phospho-HDAC2 (Ser394)： 0酸化組蛋白去乙?；?span>2抗體 兔主動脈平滑肌細胞;SMC 白血病細胞，L1210細胞 SH2細胞，小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞

TNFRSF17 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 TNFRSF17 / BCMA 人細胞裂解液 (陽性對照) 人抗狂犬病毒抗體(ai-RV)ELISA 試劑盒 Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原) 0.5mg

phospho-HOMER3 (Thr36)： 0酸化HOMER3蛋白抗體 人少突膠質細胞

IMR-32細胞，人神經母細胞瘤細胞 黃桿菌屬 人腦血管平滑肌細胞RNAHBCSMC miRNA5 μg 人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)ELISA 試劑盒 ARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原 0.5mg

HRAS+KRAS： 轉化蛋白p21抗體 HA Others H16N3 甲型流感 H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生）。