Hut-78人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

U251(人膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 豚鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒 IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗IgG 0.1ml

FAM13B1： FAM13B1蛋白抗體 人肝間充質(zhì)干細(xì)胞(肝)(HMSC-HE)(5×105)

小鼠血細(xì)胞;WEHI-3 [WEHI3] 豚鼠端粒酶(TE)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗IgM 0.1ml

FUT8： 巖藻糖轉(zhuǎn)移酶8抗體 綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞;MFC-GFP 小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

TNFRSF1B Others Cynomolgus 食蟹猴 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 豚鼠膽囊收縮素A受體(CCKAR)ELISA試劑盒 IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗IgM 0.1ml

MELK： 蛋白激酶MPK38抗體 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7

IFNG Protein Mouse 重組小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (His 標(biāo)簽) 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒 Mouse eosinophil cationic protein,ECP  小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白 96T

MGST1： 微粒體S轉(zhuǎn)移酶1抗體 SERPINB6B Others Mouse 小鼠 Serpinb6b 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)ELISA 試劑盒 IL-1sR I (Rabbit soluble interleukin-1 receptor I )  兔子白介素1可溶性受體I 96T

MUC13： 粘蛋白13抗體 CW-2細(xì)胞，結(jié)腸腺癌細(xì)胞 皮膚T細(xì)胞淋巴瘤,Hut-78細(xì)胞 人成骨肉瘤細(xì)胞;MG-63

Hut-78人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞RBMX： 糖蛋白P43抗體 HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO 人骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA 試劑盒 Anti-CSP (circumsporozoite protein/Plasmodium yoelii) 環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原 0.5mg

HSD3B7： 滋養(yǎng)層細(xì)胞抗原3β7抗體 人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1

KU812(人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人骨保護(hù)素(OPG)ELISA 試劑盒 Calcitonin 抗原 0.5mg

HSP22： 熱休克蛋白-22抗體 人肺泡上皮細(xì)胞裂解物HPAEpiCL

注意事項(xiàng)：

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。