產品背景：

Bone morphogenetic protein 4 (BMP4) is a multifunctional ligand protein belonging to TGF β Family. BMP4 is expressed by endothelial cells (EC) in response to hypoxia and promotes proliferation of vascular smooth muscle cells (SMC). For example, it inhibits the proliferation of SMCs isolated from the proximal pulmonary artery while inducing the proliferation of SMCs isolated from the distal pulmonary artery. BMP4 seems to be a marker and driver of vascular calcification

產品特點：

更簡單：無需抗原抗體反應，基于小分子化學反應的檢測方法簡單高效，反應僅需要幾分鐘。

更靈敏：無需抗體，檢測染料僅BrdU抗體的1/500，很容易擴散，即便是單個增殖細胞也能準確檢測。

更快速：無需過夜，省卻了抗原抗體反應的復雜繁瑣步驟，完成整個檢測周期僅需2.5小時。

更準確：無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免變性帶來的樣品損傷，確保細胞核邊緣清晰完整。

更兼容：對樣品幾乎無損傷，更容易與多種抗體或熒光蛋白同時標記，能夠同時檢測細胞其他性狀特征

實驗步驟：

1.細胞培養(yǎng)

（以6孔板為參考，其他培養(yǎng)孔可根據(jù)實驗需要進行適當調整。）每孔1x10^5-3x10^6細胞接種于6孔板中，培養(yǎng)至正常生長階段。

注：細胞接種量，可根據(jù)細胞大小、生長速度、以及實驗處理周期等調整。

2.細胞干預或者處理

（選做）可以根據(jù)實驗需要對細胞進行藥物或者其他刺激干預處理。

3.細胞共孵育培養(yǎng)

根據(jù)預實驗結果，用細胞培養(yǎng)基按比例稀釋溶液，或者按比例在孔板培養(yǎng)液中加入適量的溶液與細胞共同孵育，同時設置不添加組作為陰性對照組。每孔加入配制的稀釋后的培養(yǎng)液共同孵育2h，去除舊培養(yǎng)液。

注意事項：

1.由于使用96孔板進行檢測，如果你的細胞要養(yǎng)48 h或更長，建議不要吝嗇96-孔板的四周邊孔，這32個邊孔不能使用，建議加入滅菌PBS以飽和中間64個孔的水分。因為細胞培養(yǎng)過程中，邊孔的水分蒸發(fā)很快，培養(yǎng)液及里面的藥物會出現(xiàn)濃縮現(xiàn)象，細胞的狀況就復雜了。

2.溶劑在低溫情況下會凝固，使用前請室溫放置或20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。

3.一般4oC避光保存兩周內有效，保存在-20度長期保存，避免反復凍融，小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解，尤其當變?yōu)榛揖G色時就不能再用了。

4.Formazan溶解液結凍或產生沉淀時可以37℃水浴孵育以促進溶解，并且必須在全部溶解并混勻后使用。

5.孵育時，須避光。

6.有致癌性，用的時候小心，有條件帶那種透明的簿膜手套。配成的需要無菌，對菌很敏感。

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