注意事項:
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:綠膿假單胞菌PCR檢測試劑盒價格
英文名稱:Pseudomonas aeruginosaPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
綠膿假單胞菌PCR檢測試劑盒價格原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
萘黃其他名稱: β-萘黃;5,6-并黃;β-萘基黃英文名稱: β-Naphthoflavone其他名稱: 5,6-Benzoflavone產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 1克/5克CAS號:6051-87-2
5-氮胞苷中文名稱: 5-氮胞苷其他名稱: 5-氮雜胞嘧啶核苷;5-氮雜胞苷;阿托胞苷;阿扎胞苷;氮胞苷;氮雜胞苷英文名稱: 5-Azacytidine其他名稱: 4-Ami-(β-D-ribofuranosyl)-1,3,5-triazin-2(1H)-one;Ladakamycin產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 1克/5克
聚氧乙烯雙5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,BR,分子量40001克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,中文名稱: 聚氧乙烯雙其他中文名稱: 聚乙烯二;聚氧乙烯二;聚乙二醇二英文名稱: PEG-diamine
對氨基甲甲酯中文名稱: 對氨基甲甲酯其他名稱: 4-氨基甲甲酯英文名稱: Methyl 4-aminobenzoate其他名稱: 4-Aminobenzoic acid methyl ester產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 5克/25克/100克/500克
對乙?;?0公斤國產(chǎn)中文名稱: 對乙酰基酰其他名稱: 4-乙酰氨基酰;N-乙酰酰;對乙酰氨基酰英文名稱: ASC其他名稱: N-Acetylsulfanilyl chloride;4-Acetamidobenzenesulfonyl chloride產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%
芝麻酚中文名稱: 芝麻酚其他名稱: 3,4-亞甲二氧基酚;1,3,4-三酚-3,4-縮甲;芝麻粉;3,4-二亞甲氧基酚英文名稱: Sesamol其他名稱: 3,4-(Methylenedioxy)phenol;1,3-Benzodioxol-5-ol;5-Benzodioxolol產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 25克/100克/500克
藜蘆醇中文名稱: 藜蘆醇其他名稱: 3,4-二甲氧基甲醇;3,4-二甲氧基芐醇;藜蘆基醇;綠藜蘆醇;3,4-二甲氧甲醇;3,4-二甲氧芐醇英文名稱: Veratryl alcohol其他名稱: 3,4-Dimethoxybenzyl alcohol產(chǎn)品規(guī)格: BR包 裝: 25克/100克/500克
N-乙烯基吡咯中文名稱: N-乙烯基吡咯其他名稱: 1-乙烯基-2-吡咯;N-乙烯基-2-吡咯;1-乙烯基-2-吡啶;N-乙烯基吡啶;乙烯基吡咯;正乙基-2-呲英文名稱: NVP其他名稱: N-Vinyl-2-pyrrolidone;-Vinyl-2-pyrrolidone;N-Vinylbutyrolactam產(chǎn)品規(guī)格: AR,99%包 裝: 100毫升/500毫升/2.5升
綠膿假單胞菌PCR檢測試劑盒價格2-Amino-7-bromobenzothiazole 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(T)
4,7-DIBROMO-2,1,3-BENZOTHIADIAZOLE 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
FMOC-L-Valine 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
Hexamethylene diacrylate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T)
Vincristine sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
2-AMINO-4-CHLOROTOLUENE HYDROCHLORIDE 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
Aucubin 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
L-Theanine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
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