PCR檢測試劑盒原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,產(chǎn)品僅用于科研經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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注意事項:
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應,使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
阿米舒必利(標準品) * 規(guī)格:>98%,標準品純度:>95%
非諾貝特 * 規(guī)格:>98%,BR純度:>95%
非諾貝特(標準品) * 規(guī)格:HPLC>98%,標準品純度:>95%
鹽莫西沙星 * 規(guī)格:>99%,BR純度:>95%
鹽莫西沙星(標準品) * 規(guī)格:HPLC>98%,標準品純度:>95%
昔美沙美特羅 * 規(guī)格:>98%,BR純度:>95%
普生 * 規(guī)格:>99%以上,S構(gòu)型無結(jié)晶水純度:>95%
普生(標準品) * 規(guī)格:HPLC>98%,標準品純度:>95%
潑尼松 * 規(guī)格:>98%,USP30,BR純度:>95%
潑尼松(標準品) * 規(guī)格:HPLC>98%,標準品純度:>95%
強力霉素堿/強力霉素一水合物 * 規(guī)格:>900μg/mg,USP,BR,可用于細胞培養(yǎng)純度:>95%
唑來 * 規(guī)格:>99%,一水化合物,BR純度:>95%
唑來(標準品) * 規(guī)格:HPLC>98%,標準品純度:>95%
帕米二鈉 * 規(guī)格:>99%,五水合物純度:>95%
帕米二鈉(標準品) * 規(guī)格:HPLC>98%,標準品純度:>95%
慶大霉素 * 規(guī)格:>590IU/MG,BR純度:>95%
Adducin protein 內(nèi)收蛋白抗體 * 0.1ml Methotrexate
phospho-c-Jun(Thr91+Thr93) 磷原癌基因c-Jun抗體 * 0.1ml Methotrexate
Gibberellins 抗赤霉素抗體 * 0.1ml Nimesulide
phospho-AQP2(Ser264/261) 磷水通道蛋白2抗體 * 0.1ml Miconazole Nitrate
Mycobacterium bovis 牛結(jié)核桿菌菌體蛋白抗體 * 0.2ml Miconazole Nitrate
PCR檢測試劑盒CK12/Cytokeratin 12 細胞角蛋白12抗體 * 0.2ml Micronomicin Sulfate
HE4/Epididymal secretory protein E4 附睪分泌蛋白4抗體 * 0.2ml Micronomicin Sulfate
Beta galactosidase β半乳糖苷酶抗體 * 0.2ml 4-MUG
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