【方法】利用亮發(fā)光桿菌富集培養(yǎng)基分離喜樹種子內(nèi)生放線菌，并根據(jù)菌落形態(tài)及 16S rRNA 基因序列同源性分析進(jìn)行菌種鑒定；以及利用與病原微生物共培養(yǎng)方法檢測分離菌株的抗菌活性。

【結(jié)果】從上海交通大學(xué)校園的喜樹種子中共分離到 33株內(nèi)生疑似放線菌，經(jīng)基于 16S rRNA基因序列分析的分子鑒定，確定其中 21 株屬于鏈霉菌，1 株屬于擬諾卡氏菌，另有 3 株由于序列相似性低于 95%而無法分類；8 株因未能克隆 16S rRNA 基因序列而未確定分類。這 11 株疑似內(nèi)生放線菌是否是新放線菌(種)類群，有待后續(xù)深入研究。初步的抗細(xì)菌、真菌活性檢測發(fā)現(xiàn)，分離到的內(nèi)生放線菌中 42.42%以上對立枯絲核菌(Rhizoctonia solani Kühn)有很強(qiáng)的抑制菌核形成的作用，54.54%內(nèi)生菌有較強(qiáng)抑制芽孢桿菌生長的作用。并且挑選其中具有代表性的菌株 Streptomyces sp. CXSZ1 進(jìn)行代謝產(chǎn)物的分析，初步發(fā)現(xiàn)其代謝產(chǎn)物中含有抗細(xì)菌活性成分。

【結(jié)論】喜樹種子內(nèi)生放線菌的分離、鑒定及生物活性物質(zhì)分離鑒定的研究工作，一方面可以為揭示喜樹等高等植物種子內(nèi)生菌的起源、演化等提供有價(jià)值的信息，同時(shí)也為新結(jié)構(gòu)、新活性化合物發(fā)掘提供實(shí)驗(yàn)材料。

植物內(nèi)生菌長期生活于某種植物內(nèi)部，因其*的生存環(huán)境，可能進(jìn)化出與宿主植物類似的代謝途徑與產(chǎn)物。近年來，植物內(nèi)生菌作為一種新的微生物資源，而成為天然產(chǎn)物發(fā)掘的熱點(diǎn)，并成功篩選到了紫杉醇、鬼臼毒素、長春堿等化合物產(chǎn)生菌。獲得特定生物活性物質(zhì)產(chǎn)生菌，不僅為環(huán)保、可持續(xù)天然產(chǎn)物，及實(shí)現(xiàn)規(guī)模化提供了有利條件；同時(shí)，也為復(fù)雜天然產(chǎn)物生物合成途徑理論研究提供了更好的實(shí)驗(yàn)材料。

喜樹為我國*珙桐科高大喬木，其次生代謝產(chǎn)物中的喜樹堿(Camptothecin，CPT)通過作用于拓?fù)洚悩?gòu)酶 I (Topo I)，而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。喜樹堿及其衍生物已被廣泛應(yīng)用于肝癌、胃癌、膀胱癌及白血病等的臨床治療。迄今對于喜樹內(nèi)生菌的研究主要集中在內(nèi)生亮發(fā)光桿菌，并且已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了能夠產(chǎn)喜樹堿的內(nèi)生真菌；對喜樹的根、莖、葉等器官中的內(nèi)生放線菌已有研究，但對喜樹種子內(nèi)生放線菌的研究尚未見報(bào)道。
中藥對照藥材    TLC法鑒別    121070-200503    知母        0.5g
中藥對照藥材    TLC法鑒別    121071-200502    狗脊        5.0g
中藥對照藥材    TLC法鑒別    121072-200505    枸杞子        0.5g
中藥對照藥材    TLC法鑒別    121073-9901    胡黃連        1.0g
中藥對照藥材    TLC法鑒別    121074-200402    萊菔子        1.0g
中藥對照藥材    TLC法鑒別    121075-200402    桑寄生        5.0g
中藥對照藥材    TLC法鑒別    121076-9901    救必應(yīng)        4.0g
中藥對照藥材    TLC法鑒別    121077-9901    積雪草        1.5g
中藥對照藥材    TLC法鑒別    121078-200402    五倍子        1.0g
亮發(fā)光桿菌