對于青海發(fā)光桿菌來說,蛋白質(zhì)占其干重的60%到80%,消耗細菌2/3的能量支出,促使細菌將zui主要的代謝與能量資源用于其蛋白質(zhì)合成。因此蛋白質(zhì)合成在細菌生長中處于核心環(huán)節(jié),通過定量研究細菌的蛋白質(zhì)合成,將有利于理解細菌是如何在不利環(huán)境下保持其自身活力的“星星之火”,度過艱苦歲月,并且在環(huán)境改善時恢復(fù)活力。核糖體是負責(zé)合成蛋白質(zhì)的“工人”。蛋白質(zhì)的合成速率一般認為取決于兩個指標(biāo)即核糖體的含量(工人數(shù)量)以及單位核糖體的翻譯延伸速率(工人工作速度)。
在技術(shù)方面,目前已有的針對細菌核糖體翻譯延伸速率的測定方法有相當(dāng)?shù)木窒扌?,不適合定量生物學(xué),特別是體內(nèi)實時定量生物學(xué)的發(fā)展。為此王憶平課題組在核酸研究上發(fā)表了新技術(shù)成果,建立了一種基于的beta-半乳糖苷酶互補系統(tǒng)(complementat*tem)的方法,用來實時的測定細菌翻譯延伸速率。
這一方法通過將不同目的基因的末端與一個小的β-galactosidase阿爾法片段(編碼β-galactosidaseN端起始60個氨基酸)融合,通過測定加入誘導(dǎo)物IPTG后新生融合蛋白的初始產(chǎn)出時間,測定報告基因產(chǎn)物β-galactosidase阿爾法片段的初始產(chǎn)出時間,從而推導(dǎo)出不同基因的翻譯延伸速率。該青海發(fā)光桿菌方法快捷簡單,解決了已有的兩種方法即同位素示蹤法(需要雙同位素標(biāo)記以及2-D電泳分離,非常繁瑣耗時)以及LacZ誘導(dǎo)法(只能測定LacZ單個基因的數(shù)據(jù))的局限性,具有較高的實用性。
另外在理論方面,揭示了細菌應(yīng)對環(huán)境變化“能屈能伸”的魯棒性(robustness),即使環(huán)境極其惡劣其細胞內(nèi)部也保有充沛精力(核糖體數(shù)量),并時刻準備著環(huán)境改善的時機到來。
17alpha-Dihydroequilin YSRIBIO1701 651-55-8 50mg 17- 雌二醇標(biāo)準品
1-Butanol YSRIBIO1700 71-36-3 1.2ml×3ampules 正丁醇標(biāo)準品
Sulindac YSRIBIO170 38194-50-2 200mg 舒林酸標(biāo)準品
1-Pentanol YSRIBIO1699 71-41-0 1.2ml×3ampules 1-戊醇標(biāo)準品
1-Propanol YSRIBIO1698 71-23-8 1.2ml×3ampules 1-丙醇標(biāo)準品
2,4-Dichlorophenol YSRIBIO1697 120-83-2 100mg 2,4-二氯酚標(biāo)準品
23-EPI-26-Deoxyactein YSRIBIO1696 264624-38-6 20mg 脫氧升麻烴標(biāo)準品
2-Amino-5-chlorobenzophenone YSRIBIO1695 25mg 2-氨基-5-氯苯甲酮標(biāo)準品
青海發(fā)光桿菌
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