“亮發(fā)光桿菌總數(shù)”是評價食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標(biāo),其檢測工作在某種程度上具有相當(dāng)?shù)牟豢杀刃?,這就要求檢測人員要嚴(yán)格執(zhí)行科學(xué)的操作程序。GB/T4789.2 中只是簡要提到了檢測程序,對實際操作過程中容易出現(xiàn)的問題未作詳細(xì)說明。本人通過實踐及多次對比試驗,現(xiàn)就檢測中容易出現(xiàn)的問題,作一闡述。
樣品的制備和稀釋倍數(shù)的選擇
對于冰凍的樣品,在接種前要放到0~4℃的冰箱中解凍。固體樣品要用滅菌刀或鑷子從不同部位采取試驗材料并混合,在無菌操作下充分研細(xì),混勻,做成均勻稀釋液。樣品制備的整個過程都應(yīng)在無菌狀態(tài)下進(jìn)行,以防污染。任何樣品在打開包裝前,都要在取樣開口處的周圍表面進(jìn)行消毒。以上過程的誤操作是:冰凍樣品的解凍時間過長,導(dǎo)致細(xì)菌增殖,使實測結(jié)果偏高;固體樣品取樣不均衡,稀釋液未充分混勻,使所測結(jié)果準(zhǔn)確度降低;取樣時未進(jìn)行外包裝消毒,引起樣品污染。
充氣飲料應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行排氣;酸性樣品用經(jīng)過滅菌的20~30% 碳酸鈉溶液調(diào)整pH 值到中性;含鹽量較高的樣品應(yīng)用滅菌蒸餾水進(jìn)行稀釋。誤操作是:充氣飲料未經(jīng)排氣,使樣品接種量偏低;酸性樣品未調(diào)pH 值,使不適合酸性狀態(tài)下生長的細(xì)菌受抑制;高鹽樣品仍用生理鹽水進(jìn)行稀釋,使不適于高鹽狀態(tài)下生長的細(xì)菌受抑制,結(jié)果均使實測值偏低。
不同的食品其「菌落總數(shù)」的檢出*也不一致。醬油、奶制品、熟肉制品等細(xì)菌含量一般偏高,稀釋度可相應(yīng)選擇較大的,如1:100 和1:1000 等,而飲料、糕點類樣品中細(xì)菌量偏低,稀釋度應(yīng)選擇較小的,如液體樣品可選原樣,固體樣品選1:10 等。誤操作是或者選擇的稀釋度過大,使得菌落生長,或者稀釋度過小,菌落生長密度高,難以計數(shù),導(dǎo)致實測結(jié)果或偏高或偏低。
接種、培養(yǎng)過程中應(yīng)注意的問題
接種時,用移液管吸取稀釋液不應(yīng)用吸球,而要用管口上部塞有脫脂棉球的經(jīng)過高溫烘烤的移液管,并且用嘴吸取,以防產(chǎn)生交叉污染。稀釋液加入平皿后,應(yīng)在盡可能快的時間內(nèi)傾入瓊脂(傾倒瓊脂時,應(yīng)保證瓊脂溫度在50~60℃,溫度過高,易殺死細(xì)菌;溫度過低,則瓊脂提前凝固,導(dǎo)致檢測失?。?,并立即在桌面上推旋平皿,使樣液與瓊脂混合均勻,切忌推旋動作過大,將瓊脂濺到平皿蓋上,影響測定結(jié)果。
平皿內(nèi)瓊脂凝固后,不要長久放置后才翻轉(zhuǎn)平皿培養(yǎng),而應(yīng)在瓊脂凝固后立即將平皿翻轉(zhuǎn)予以培養(yǎng),這樣可避免菌落蔓延生長,難以計數(shù)。
配制、分裝稀釋液或傾注平板不能在日光直射下進(jìn)行,以防強烈的日光將細(xì)菌殺死。
在培養(yǎng)時,恒溫培養(yǎng)箱的溫度不能過高,以免出現(xiàn)蔓延生亮發(fā)光桿菌的趨勢,但也要防止因通風(fēng)和空氣循環(huán)而造成的培養(yǎng)基太干,而影響細(xì)菌的正常生長。
≥98% Ursolic acid *: 烏索酸 規(guī)格:
≥98% Schisanlactone E *: 五內(nèi)脂 規(guī)格:
≥98% Schisandrin C *: 五味子丙素 規(guī)格:
≥98% sipeimine *: 西貝堿 規(guī)格:
≥95% Crocin II *: 西紅花苷Ⅱ 規(guī)格:
≥98% Sirolimus *: 西羅莫司 規(guī)格:
亮發(fā)光桿菌
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