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    免疫熒光測定

    點擊次數(shù):1540次  更新時間:2015-06-30

        評估免疫熒光干式定量法檢測全血C-反應蛋白(CRP)的臨床應用價值。方法150例住院患者,采用免疫熒光干式定量法檢測全血CRP,采用常規(guī)免疫比濁法檢測血清CRP,檢測結(jié)果用統(tǒng)計學軟件進行分析。結(jié)果與常規(guī)免疫比濁法檢測血清比較,使用免疫熒光干式定量法檢測全血,兩種方法所得的CRP檢測結(jié)果相符,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結(jié)論采用免疫熒光干式定量法檢測全血CRP,具有快速、簡便、結(jié)果可靠等特點,可作為臨床一種快速檢測感染過程和自身免疫疾病的工具。

        激光掃描共聚焦顯微鏡可以對經(jīng)過熒光標記的組織標本共聚焦熒光進行定量分析.并顯示熒光沿Z軸的強度變化。它除了可以對單、雙或三重標記的細胞及組織標本的熒光進行定量、定位分析外,還可以借助顯微CT功能在不損失分辨率的前提下對標本深層進行熒光分布的測量.獲得組織形態(tài)結(jié)構(gòu)信息。激光掃描共聚焦顯微鏡同樣適用于高靈敏度的快速免疫熒光測定,從而準確檢測抗原表達、熒光原位雜交斑點及組織細胞結(jié)構(gòu)的形態(tài)學特性,并作定量分析。
     
        先按照免疫熒光組織化學技術(shù)進行熒光染色,再用激光掃描共聚焦顯微鏡對其進行定量和形態(tài)學分析。我國學者為確定某些物質(zhì)(如豬苓多糖)是否對培養(yǎng)的膀胱癌T!;:細胞抑癌基因p53和抑制細胞凋亡基因蛋白H-fas表達有調(diào)節(jié)作用,用激光掃描共聚焦顯微鏡對經(jīng)免疫熒光細胞化學染色的細胞進行共聚焦熒光斷層掃描成像,每個細胞掃32個切面,用三維和定量軟件觀察與測定細胞內(nèi)熒光變化,細胞培養(yǎng)24小時,對照組p53主要在細胞核內(nèi)表達,陽性信號呈黃綠色亮點,點狀分布,呈現(xiàn)一核多點表達,熒光強度較弱,為119±43。實驗組細胞核內(nèi)強熒光,為170±13,細胞質(zhì)內(nèi)也有強表達,呈彌散性分布。對于培養(yǎng)細胞的H-fas基因蛋白表達也作了同樣的檢測。通過對不同組培養(yǎng)細胞熒光強度的測定得出:豬苓多糖對膀胱癌T24 細胞p53基因蛋白表達有一定調(diào)節(jié)作用.對H-fas基因蛋白 表達無明顯影響(曾星等,2003)。近年來,應用激光共聚焦掃描顯微鏡對腫瘤相關抗原等進行定性定量研究的報道頗多,由此可見,激光掃描共聚焦顯微鏡在這一領域的應用十分廣泛。

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