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    原代細(xì)胞的傳代和凍存過(guò)程是怎樣的

    點(diǎn)擊次數(shù):1523次  更新時(shí)間:2020-11-22
       原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培養(yǎng)。因此,較為嚴(yán)格地說(shuō)是指成功傳代之前的培養(yǎng),此時(shí)的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì),如果是正常細(xì)胞,仍然保留二倍體數(shù)。因?yàn)榭梢阅M機(jī)體的功能,主要用于:生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究。
     
      原代細(xì)胞的傳代和凍存過(guò)程:
      細(xì)胞傳代:
      原代細(xì)胞有間隙抑制接觸不良反應(yīng),所以細(xì)胞不能到達(dá)全部的密度的時(shí)候傳代,一般有效的建議觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)周期,原代細(xì)胞在細(xì)胞密度達(dá)到85%左右的時(shí)候傳代較佳,當(dāng)生長(zhǎng)至全部匯合時(shí),它就會(huì)衰老。記住,所有的原代細(xì)胞不是全純,因此我們要盡量減少污染細(xì)胞的生長(zhǎng)。當(dāng)細(xì)胞傳代時(shí),使用低濃度的胰蛋白酶,也可以嘗試下整體消化套裝,并在顯微鏡下密切監(jiān)測(cè)細(xì)胞。此外,記得在胰蛋白酶消化后*中和細(xì)胞中的胰酶,因?yàn)槿魏位钚缘囊鹊鞍酌付紝p傷細(xì)胞。
     
      細(xì)胞凍存:
      通常不推薦重新凍存原代細(xì)胞,因?yàn)檫@可以促進(jìn)細(xì)胞衰老和/或?qū)е鹿δ茏兓T?xì)胞非常敏感,重新凍結(jié)可能導(dǎo)致細(xì)胞死亡或損傷。
     
      與細(xì)胞系不同,原代細(xì)胞增殖有限,我們建議盡早使用原代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)以防止遺傳漂移,如果你正在使用一個(gè)增殖困難的細(xì)胞類型,你應(yīng)該密切監(jiān)測(cè)細(xì)胞形態(tài),因?yàn)樯倭炕祀s的細(xì)胞(如成纖維細(xì)胞)可能隨著時(shí)間的推移,大量生長(zhǎng)從而成為主要細(xì)胞。
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