elisa檢測試劑盒標(biāo)本收集保留不妥致細(xì)菌污染,菌體中也許富含內(nèi)源性HRP,會(huì)發(fā)生假陽性反響;標(biāo)本在冰箱中保留時(shí)刻過長致使血清IgG聚合,易使間接法的實(shí)驗(yàn)本底加深。因而,標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢查。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)在必定溫度下的反響時(shí)刻并不是反響的結(jié)尾,溫育時(shí)刻過短、溫度過低,易致顯色不全;溫育時(shí)刻過長、溫度過高,易致非特異性緊附于反響孔周圍,難以清潔*,發(fā)生陰性高值或假陽性反響。要嚴(yán)厲按規(guī)則的溫度和溫育時(shí)刻進(jìn)行。
假如參加的酶物過多或加在較高的孔壁上或孔口,也會(huì)致使本底添加或假陽性。水浴箱門,嚴(yán)厲控制水浴的溫度為37±0.5。同時(shí),微孔板不可堆疊放置,以確保傳熱均勻,各板的溫度都能敏捷到達(dá)平衡。
當(dāng)標(biāo)本收集保留不妥發(fā)生溶血時(shí),紅細(xì)胞中的血紅蛋白釋放到血清中,血紅蛋白具有過氧化物酶的性質(zhì),其通過吸附或“PP效應(yīng)"(蛋白質(zhì)間相互吸附的景象)后,可催化A、B液顯色而形成假陽性。
因?yàn)樵噭┖幸话阍O(shè)定的反響溫度為37度,在這個(gè)溫度下溫育必定時(shí)刻,蒸騰的水分會(huì)許多,關(guān)于全部反響系統(tǒng)來講,各種反響物的濃度會(huì)不斷地添加,這么必會(huì)致使反響zui終的值添加。
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