簡單青海發(fā)光桿菌染色通常只用一種染色劑,使細菌整個細胞染上顏色。但看不清結構。所以只便于檢查細菌的形態(tài)、大小和排列方式等。
【實驗目的】
1、掌握單染色的操作技術
2、觀察細菌的基本形態(tài)
【實驗原理】
單染色即用單純的種染料進行染色,多數(shù)采用美藍、結晶紫或石碳酸復紅等堿性染料。此法僅能顯示細胞的外部形態(tài),而不能辨別其內(nèi)部結構。染色前必須將細胞固定,其目的是殺死細菌,并使它粘附在載玻片上。此外,還可以增加菌體對染料的親和力。常用的有加熱和化學固定兩種方法。無論用哪種方法都應盡量使細菌維持原有的形態(tài),防止細胞膨脹或收縮。
【實驗材料、藥品及器具】
1、菌種 大腸桿菌(Escherichia coli)
枯草芽孢桿菌(Bacillus Subtilis)
2、染色液 石炭酸品紅染色或結晶紫染色液(Stining Solutions)
3、無菌水
4、洗瓶裝蒸餾水
5、洗凈的載玻片(Slicle)5片
6、顯微鏡、香柏油、接種環(huán)、酒精燈、擦鏡紙、吸水紙、二甲苯
【實驗步驟】
1、涂片:取一片干凈無油載玻片,在其中央滴一滴無菌水,然后用接種環(huán)以無菌操作方法取少許培養(yǎng)好的大腸桿菌,放在載玻片的水滴中涂勻,注意菌量不宜過多,否則,不易看清單個菌體。
2、固定:將涂好的玻片在空氣中風干或火焰上通過3~4 次,使水份蒸發(fā),此時細菌菌體緊貼在玻片上。
3、染色:用石炭酸品紅或結晶紫染色劑30~60S,然后用洗瓶輕輕沖洗染色劑(注意不要直接沖洗染色部位),直至無多余的染液,晾干或用吸水紙從旁吸干或用微火烘干。
4、用同樣方法將枯草芽孢桿菌制作一張涂片。
5、鏡檢:首先在低倍鏡下找到物像,然后在涂膜中央滴一滴香柏油,換成油浸鏡觀察兩個菌種的形態(tài)和排列。
6、去除油鏡上的香柏油:先用干凈的擦鏡紙擦2-3 次,再換另一張擦鏡紙蘸取少許二甲苯以除去殘留的香柏油,zui后用擦鏡紙擦干。擦鏡頭時應順著鏡頭直徑方向擦,不要沿著圓周方向擦。
【青海發(fā)光桿菌實驗結果】
1、繪制觀察到大腸桿菌和枯草芽孢桿菌的形態(tài)圖,并注明放大倍數(shù)。
2、用文字描述兩菌株的細胞形態(tài)。
丙烯菊酯 標準品 CAS號:584-79-2 100MG
草毒死標準品 CAS號: 93-71-0 100MG
枯殺達 標準品 CAS號:55635-13-7 250MG
烯丙孕素 標準品 CAS號:850-52-2 100MG
莠滅凈 標準品 CAS號:834-12-8 250MG
艾維激素 標準品 CAS號:55720-26-8 5mg
雙甲脒 標準品 CAS號:33089-61-1 250MG
青海發(fā)光桿菌
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